正丁醇、氯仿混合溶液（正丁醇：氯仿=1：4或1：5）和样物提取液混合并且振荡,不需要加热
利用离心机离心,直到离液面交界处无白色混悬,也就是蛋白质介于提取液与试剂交界处.
上中下依次分为水层、蛋白层、有机层.